Виготовлення препаратів з культур мікроорганізмів І забарвлення їх простим способом




Скачати 94.38 Kb.
НазваВиготовлення препаратів з культур мікроорганізмів І забарвлення їх простим способом
Дата конвертації05.07.2013
Розмір94.38 Kb.
ТипДокументы
skaz.com.ua > Культура > Документы
ІНСТРУКЦІЯ

до проведення практичного заняття №4
Дисципліна: «Мікробіологія з основами імунології та технікою мікробіологічних досліджень»

Тема: Виготовлення препаратів з культур мікроорганізмів і забарвлення їх простим способом

Спеціальність: «Лабораторна діагностика»


Оснащення:

- світлові мікроскопи;

- імерсійне масло;

- лабораторний посуд (пробірки, піпетки, чашки Петрі);

- шпатель, пінцет;

- предметні і покривні скельця;

- бактеріальні петлі;

- барвники (лужний метиленовий синій, фуксин Пфейффера);

- лотки для фарбування;

- пісочні годинники;

- олівець по склу (маркер);

- культури мікроорганізмів (агарова і бульйонна)

- дезінфекційний розчин;

- ізотонічний розчин;

- 70% спирт;

- вата;

- спиртівка, сухий спирт, сірники;

- дистильована вода;

- фільтрувальний папір;

- гумові рукавички, мило, рушник.

Конкретні цілі:

Знати:

Морфологію мікроорганізмів. Методи приготування препаратів з культур мікроорганізмів. Методику простого методу забарвлення мікроорганізмів.

Вміти:

- Дотримуватися правил роботи і техніки безпеки з інфекційним матеріалом, культурами мікроорганізмів, апаратурою.

- Виготовляти мазки-препарати з бульйонної та агарової культур мікроорганізмів.

- Забарвлювати препарати простим способом.

- Досліджувати забарвлені препарати під мікроскопом з використанням імерсійної системи.

^ Практичні навички:

- Виготовлення мазків-препаратів з бактеріальної культури, що виросла на щільному і рідкому живильному середовищі.

- Забарвлення препаратів простим способом.

- Дослідження забарвлених препаратів під мікроскопом з використанням імерсійної системи.

- Дотримуватись правил техніки безпеки, охорони праці в галузі, професійної безпеки, протиепідемічного режиму, чинних наказів МОЗ України під час роботи з інфекційним матеріалом, культурами мікроорганізмів, обладнанням, апаратурою.

^ Хід заняття:

Виготовлення мазків-препаратів із агарової та бульйонної культур мікроорганізмів.

Завдання №1. Ознайомтеся з алгоритмами виконання практичних навичок.
алгоритм «Виготовлення мазка з агарової культури»:

Мазки з культур виготовляють для вивчення їх морфології та тинкторіальних властивостей.

Оснащення:

- агарова культура;

- лабораторний посуд;

- спиртівка, сухий спирт, сірники;

- ізотонічний розчин;

- дезінфекційний розчин;

- предметні скельця;

- бактеріальні петлі;

- олівець по склу (маркер);

- пінцет;

- гумові рукавички, мило, рушник.


ЕТАПИ

обгрунтування

І. ПІДГОТОВЧИЙ ЕТАП

1. Надягніть гумові рукавички.

2. Підготуйте предметне скло.

3. Нанесіть контури майбутнього мазка.

4. Переверніть скло.

5. У лівому верхньому куті скла (зі зворотної сторони) поставте свій номер.


Нанесений контур знизу.

ІІ. ВИКОНАННЯ НАВИЧКИ

1. Зафламбуйте бактеріологічну петлю: візьміть бактеріологічну петлю в праву руку так, як тримаєте олівець.

2. Нанесіть краплю стерильного ізотонічного розчину натрію хлориду на предметне скло.

3. Зафламбуйте бактеріологічну петлю.

4. Відкрийте лівою рукою чашку Петрі з ростом культури мікроорганізмів.

5. Притуліть бактеріологічну петлю до стінки чашки Петрі.

6. Візьміть петлею матеріал з однієї колонії.
7. Закрийте чашку Петрі.

8. Нанесіть матеріал на суху поверхню скла поряд із краплею ізотонічного розчину натрію хлориду і розітріть.

9. Рівномірно розмішайте матеріал із краплею ізотонічного розчину натрію хлориду.

10. Зафламбуйте бактеріологічну петлю.

11. Залишіть мазок для висихання.


Охолодження петлі.
Слід брати колонію мікроорганізмів, а не агар.
Мазок повинен бути тонким, рівно розтертим в діаметрі не більше однієї копійки.


Висушувати мазки слід на повітрі. Під впливом високої температури структура мікробної клітини порушується.

ЕТАПИ

ОБҐРУНТУВАННЯ

ІІІ. ЗАКІНЧЕННЯ НАВИЧКИ

1. Проведіть дезінфекцію рук, робочого місця.


Забезпечується інфекційна безпека.


Алгоритм «Виготовлення мазка з бульйонної культури»

Для виготовлення препарату не потрібне нанесення краплі ізотонічного розчину.

Оснащення:

- бульйонна культура;

- спиртівка, сухий спирт, сірники;

- лабораторний посуд (чашка Петрі, піпетки)

- предметні скельця;

- дезінфекційний розчин;

- бактеріальні петлі;

- олівець по склу (маркер);

- пінцет;

- гумові рукавички, мило, рушник.


ЕТАПИ

обгрунтування

І. ПІДГОТОВЧИЙ ЕТАП

1. Надягніть гумові рукавички.

2. Підготуйте предметне скло.

3. Нанесіть контури майбутнього мазка.

4. Переверніть скло.

5. У лівому верхньому куті скла поставте свій номер.


Нанесений контур має бути знизу.

ІІ. ВИКОНАННЯ НАВИЧКИ

1. Зафламбуйте скло у полум’ї спиртівки

2. Покладіть скельце у кришку чашки Петрі.

3. Зафламбуйте бактеріологічну петлю, візьміть бульйонну культуру.

4. Нанесіть краплю культури на предметне скельце.

5. Розітріть до розміру монети вартістю 1 копійка.
6. Зафламбуйте бактеріологічну петлю.

7. Залишіть мазок для висихання.


Скло тримати пінцетом.
Під час роботи з живими культурами ретельно дотримуйтесь техніки безпеки.
Мазок має бути тонким, прозорим, рівно-мірним, невеликим.
Висушувати мазки слід на повітрі. Під впливом високої температури структура мікробної клітини порушується.

ІІІ. ЗАКІНЧЕННЯ НАВИЧКИ

1. Проведіть дезінфекцію рук, робочого місця.


Забезпечується інфекційна безпека.


^ Завдання №2. Фіксування мазків.

Мазки фіксують для: закріплення матеріалу на склі, знезараження, кращого фарбування (вбиті мікроби краще поглинають барвник).

Для фіксації мазків використовують два способи: фізичний і хімічний.

^ Фізичний спосіб. Фіксацію проводять у полум’я спиртівки протягом 6 сек. Для цього скло беруть пінцетом або І і ІІ пальцями правої руки і проводять тричі повільно через верхню частину полум’я мазком догори. Правильність фіксації перевіряють, торкаючись нижньою поверхнею скла тильної сторони лівої руки. Мазок повинен бути гарячим, але не обпікати руку.

Цим методом фіксують мазки, виготовлені з культури мікроорганізмів, за умови, що під час нагрівання не змінюється структура мікробної клітини.

^ Хімічний спосіб. Для фіксації використовують хімічні речовини: безводний мети-ловий спирт – фіксують протягом 5 хв., спирт етиловий 96% - 10-15 хв., суміш Нікіфорова – 10-15 хв., ацетон – 5 хв., суміш парів хлоридної кислоти і формаліну – декілька секунд.

Хімічним способом фіксують мазки, виготовлені із патологічного матеріалу, а також з культури в тому разі, коли під час нагрівання може порушитися структура бактеріальної клітини (капсульні форми бактерій, спірохети).

^ Зафіксований мазок називається препаратом.
Завдання №3. Зафіксуйте мазки, виготовлені з агарової і бульйонної культури, фізичним методом.
Алгоритм «Фіксація мазка фізичним способом»:

- візьміть пінцетом предметне скло з висушеним мазком;

- проведіть тричі через верхню частину полум’я спиртівки;

- доторкніться нижньою поверхнею скла до тильної сторони лівої руки (перевірка правильності фіксації).
Увага! Забороняється залишати на відкритих місцях або в не опечатаних сховищах неза-фіксовані мазки після закінчення роботи!
^ Завдання №4. Під керівництвом викладача приготуйте препарати з бульйонної і агарової культур.
Завдання №5 Під керівництвом викладача проведіть забарвлення препаратів простим методом (лужною метиленовою синькою або фуксином Пфейффера).
Алгоритм «Забарвлення препарату простим методом»:

Під час простого методу фарбування використовують один барвник – частіше це фуксин Пфейффера або метиленовий синій. Цей метод ще називається орієнтовним, оскільки його використовують тільки для виявлення мікробів у патологічному матеріалі, визначення їх кількості, форми, взаємного розташування.

Оснащення:

- лабораторний посуд (чашки Петрі, піпетки);

- пінцет;

- лоток для фарбування.

- барвники: фуксину Пфейффера, лужний метиленовий синій;

- вода;

- пісочний годинник;

- фільтрувальний папір;

- гумові рукавички, мило, рушник.


ЕТАПИ

ОБҐРУНТУВАННЯ

І. ПІДГОТОВЧИЙ ЕТАП

1. Надягніть гумові рукавички.

2. Помістіть препарат на підставку в лоток для фарбування.




ІІ. ВИКОНАННЯ НАВИЧКИ

1. На зафіксований препарат нанесіть декілька крапель барвника піпеткою, щоб він закрив весь препарат.

2. Термін дії барвника: фуксин Пфейффера – 1-2 хв., метиленовий синій – 3-5 хв.

3. Промийте препарат водою.







ЕТАПИ

ОБҐРУНТУВАННЯ

4. Просушіть фільтрувальним папером, досушіть на повітрі.

.

ІІІ. ЗАКІНЧЕННЯ НАВИЧКИ

1. Проведіть дезінфекцію робочого місця, рук.


Забезпечується інфекційна безпека.


Завдання №6. Проведіть мікроскопію забарвлених препаратів у імерсійній системі: визначте форму і розташування мікроорганізмів у препараті. Замалюйте у щоденник.
Завдання №7. Проведіть дезінфекцію робочого місця, рук.
Завдання №8. Оформіть щоденник. Зробіть висновки.




Література:

В.А. Люта, О.В. Кононов «Практикум з мікробіології», стор. 30-33.



Схожі:

Виготовлення препаратів з культур мікроорганізмів І забарвлення їх простим способом iconВиготовлення препаратів з патологічного матеріалу. Виготовлення нативних...
Дисципліна: «Мікробіологія з основами імунології та технікою мікробіологічних досліджень»
Виготовлення препаратів з культур мікроорганізмів І забарвлення їх простим способом iconМетоди виділення чистих культур мікроорганізмів
Дисципліна: «Мікробіологія з основами імунології та технікою мікробіологічних досліджень»
Виготовлення препаратів з культур мікроорганізмів І забарвлення їх простим способом iconТехнологія одержання препаратів тетрацикліну
Тетрацикліни знайшли широке застосування як у медицині, так І у виробництві кормових препаратів. Серед них для сільського господарства...
Виготовлення препаратів з культур мікроорганізмів І забарвлення їх простим способом iconБактеріологічний метод дослідження. Будова мікроскопа. Робота з імерсійною...
Дисципліна: «Мікробіологія з основами імунології та технікою мікробіологічних досліджень»
Виготовлення препаратів з культур мікроорганізмів І забарвлення їх простим способом icon«Виготовлення настінного календаря» 8 клас
Підбір та аналіз матеріалів для виготовлення виробу. Розрахунок та виготовлення шаблонів
Виготовлення препаратів з культур мікроорганізмів І забарвлення їх простим способом iconТворчий проект на тему: Виготовлення іграшкової машинки
Підбір та аналіз матеріалів для виготовлення виробу. Розрахунок та виготовлення шаблонів
Виготовлення препаратів з культур мікроорганізмів І забарвлення їх простим способом iconОбласті сортів сільськогосподарських культур
Селекція І насінництво сільськогосподарських культур” для студентів агрономічного факультету. Розділ „Сортознавство”
Виготовлення препаратів з культур мікроорганізмів І забарвлення їх простим способом iconСша – роботи переможців Квілт-шоу в Хьюстоні в номінації «Квілт ручної роботи». Майданчик №1
Писанкарство та різьблення по дереву, ліплення, витинанки, кераміка, виготовлення ляльок та ще 160 безкоштовних майстер-класів назустріч...
Виготовлення препаратів з культур мікроорганізмів І забарвлення їх простим способом iconФармакологія як наука та її місце серед медичних та фармацевтичних...
Розподіл лікарських препаратів в організмі. Метаболізм лікарських препаратів та шляхи виведення їх з організму
Виготовлення препаратів з культур мікроорганізмів І забарвлення їх простим способом iconВироби N1 І N2 виготовляються на фрезерних станках. Для їх виготовлення...
Для їх виготовлення є 100 кг металу. Витрата металу на виготовлення одного виробу N1 становить 2 кг, а на N2-4кг. Трудомісткість...
Додайте кнопку на своєму сайті:
Школьные материалы


База даних захищена авторським правом © 2015
звернутися до адміністрації
skaz.com.ua
Головна сторінка