Бактеріологічний метод дослідження. Будова мікроскопа. Робота з імерсійною системою, виготовлення барвників. Мікроскопія готових препаратів




Скачати 112.5 Kb.
НазваБактеріологічний метод дослідження. Будова мікроскопа. Робота з імерсійною системою, виготовлення барвників. Мікроскопія готових препаратів
Дата конвертації11.07.2013
Розмір112.5 Kb.
ТипДокументы
skaz.com.ua > Біологія > Документы
ІНСТРУКЦІЯ

до проведення практичного заняття №2
Дисципліна: «Мікробіологія з основами імунології та технікою мікробіологічних досліджень»

Тема: Бактеріологічний метод дослідження. Будова мікроскопа. Робота з імерсійною системою, виготовлення барвників. Мікроскопія готових препаратів

Спеціальність: «Лабораторна діагностика»


Оснащення:

- світловий мікроскоп;

- імерсійне масло;

- готові забарвлені препарати;

- лабораторний посуд (циліндри, піпетки, флакони, чашки Петрі);

- терези, ваги з різновагами;

- ступка з пестиком;

- розчини барвників,

- реактиви;

- етиловий спирт, фенол, гліцерин;

- вата;

- маркер;

- пінцет, ножиці;

- фільтрувальний папір;

- папір для зважування.

- дистильована вода;

- дезінфекційний розчин;

- гумові рукавички, мило, рушник.

Конкретні цілі:

Знати:

Бактеріоскопічний метод дослідження. Морфологію мікроорганізмів. Будову мікроскопа. Роботу з імерсійною системою. Догляд за мікроскопом.

Вміти:

- Обладнати робоче місце лаборанта.

- Виготовляти необхідні розчини фарб та інші реактиви.

- Досліджувати готові забарвлені препарати під мікроскопом з використанням імерсійної системи.

- Визначати основні морфотинкторіальні властивості збудників інфекційних хвороб.

- Дотримуватися правил техніки безпеки, охорони праці в галузі, професійної безпеки, протиепідемічного режиму, чинних наказів МОЗ України під час роботи з інфікованим матеріалом, культурами мікроорганізмів, обладнанням тощо.

^ Практичні навички:

- Будова мікрокока, правила мікроскопування. Дослідження препаратів. Визначення морфології мікроорганізмів.

- Дотримання правил техніки безпеки, охорони праці в галузі, професійної безпеки, протиепідемічного режиму, чинних наказів МОЗ України під час роботи обладнанням, апаратурою, патогенним матеріалом, кислотами, лугами, реактивами тощо.

^ Хід заняття:

основні методи мікроскопії.

Завдання №1. Вивчить основні методи мікроскопії.

Світлова мікроскопія проводиться за допомогою звичайних біологічних мікроскопів. Вона ґрунтується на тому, що світло, відбите поверхнею дзеркала, проходить через систему лінз конденсора Аббе і попадає на препарат, потім в об’єктив, окуляр і далі сприймається оком дослідника. У такий спосіб дослідник бачить уявне збільшене зображення об’єкта. Під час мікроскопії мікробіологічних препаратів слід користуватися імерсійним об’єктивом. В імерсійних системах використовують імерсійне масло (кедрове, персикове), об’єктив позначають «МІ» (масляна імерсія), або воду, об’єктив позначають «ВІ» (водна імерсія). Крім того, масляний об’єктив має на своїй поверхні чорне кільце, водний – біле. Імерсійне масло чи вода мають коефіцієнт заломлення світла, близький до такого, як у скла. Світлові промені, проходячи через предметне скло препарату, потрапляють у краплю імерсійної рідини і далі в об’єктив, не змінюючи напрямку, тому не розсіюються. Це забезпечує краще освітлення об’єкта і посилює чіткість зображення.

^ Хід променів у сухій (1) та імерсійній (2)
системах


Цей вид мікроскопії використовують здебільшого для вивчення пофарбованих препаратів, тому на світлому фоні видно забарвлений непрозорий об’єкт.

Крім світлової, використовують темнопольну, фазовоконтрастну, люмінесцентну та електронну мікроскопію.

Темнопольну і фазовоконтрастну мікроскопію використовують для вивчення мікроорганізмів у живому стані.

За допомогою люмінесцентної мікроскопії виявляють мікроби безпосередньо в патологічному матеріалі. Цей метод найбільш інформативний (можна виявити мікроорганізми навіть у невеликій кількості) і швидкий. Такий метод виявлення патогенних мікробів у патологічному матеріалі називається експрес-діагностикою.

Під час електронної мікроскопії зображення об’єкта збільшується в мільйони разів, що дає змогу вивчати структуру мікроорганізмів на субклітинному і молекулярному рівнях.
^ Завдання №2. Повторіть будову мікроскопа.

У мікробіологічний лабораторії в повсякденній практиці для вивчення морфології і тинкторіальних властивостей мікроорганізмів використовують світловий мікроскоп.

Мікроскопія включає такі етапи:

1) підготовка мікроскопа;

2) мікроскопія;

3) догляд за мікроскопом.


^ Будова мікроскопа

Механічна система:

1 – основа

2 – тубусотримач

3 – предметний столик

4 – тубус

5 – револьвер

6 – гвинт для опускання конденсора

7 – макрогвинт

8 – мікрогвинт

9 – гвинт для переміщення предметного столика
^ Оптична система:

10 – окуляр

11 – конденсор

12 – об’єктиви (сухі та імерсійний)

13 – дзеркала


УВАГА! Мікроскоп – це чутливий, точний оптичний прилад. Він потребує обережного ставлення і чіткого виконання правил під час роботи з ним. Переносячи мікроскоп, його слід тримати двома руками: однією – за тубосотримач, другу – підставляти під основу. Забруднені оптичні частини мікроскопа слід протирати м’якою тканиною, змоченою водою або спиртом.
^ Завдання №3. Підготуйте мікроскоп до роботи, проведіть мікроскопію пофарбованих препаратів, визначте морфологію бактерій.
Алгоритм «Підготовка мікроскопа до роботи»:

- поставте мікроскоп у зручну для роботи позицію, підніміть тубус;

- протріть оптичну систему;

- підніміть конденсор;

- відкрийте діафрагму конденсора;

- встановіть об’єктив (х8);

- освітіть поле зору за допомогою дзеркала.
алгоритм «Мікроскопія»:

- нанесіть краплю імерсійного масла на препарат;

- покладіть препарат на предметний столик;

- переведіть об’єктив з малого збільшення на велике (х90 МІ);

- опустіть обережно об’єктив макрогвинтами у краплю імерсійного масла (дивитися збоку);

- піднімайте повільно об’єктив макрогвинтами, доки не з’явиться зображення (дивитися в окуляр);

- встановіть чіткість зображення за допомогою мікроквинта;

- визначте форму мікроорганізмів, їх розміщення, наявність у них спор і капсул;

- підніміть тубус макрогвинтами;

- зніміть препарат з предметного столика.

алгоритм «Догляд за мікроскопом»:

- змініть імерсійне масло з лінзи об’єктива шматочком вати;

- протріть об’єктив марлевою серветкою, покладіть її на предметний столик;

- переведіть об’єктив на мале збільшення (х8);

- опустіть конденсор, закрийте діафрагму, опустіть тубус;

- поставте мікроскоп у шафу або накрийте чохлом (захист від пилу).
^ Завдання №4. Замалюйте у щоденник основні форми бактерій.
Завдання №5. Запишіть у щоденник алгоритми виконання практичної навички «Виготовлення розчинів барвників».
Алгоритм «Виготовлення розчинів барвників»:

Приготуйте посуд для зберігання розчинів барвників. Краще використовувати склянки з темного скла з пробками з резини або пластмаси. Згідно з завданням викладача приготуйте етикетку на склянку, де вкажіть:

- назву розчину барвника

- дату виготовлення

- прізвище виготівника.


завдання

вказівки до виконання

1. Обладнайте робоче місце для приготування розчинів барвників.

На робочому місці повинні знаходитись:

- барвники

- дистильована вода

- етиловий спирт

- лабораторний посуд: циліндр, піпетки, флакони

- ваги з різновагами, папір для зважування

- фенол, гліцерин

- папірці з фільтрувального паперу

- ступка з пестиком

- гумові рукавички, мило, рушник

2. Приготуйте фуксин основний (фуксин Ціля).

Розчин готується відповідно прописі:

основний фуксин

- 1 г

етанол

- 10 мл

фенол кристалічний

- 5 г

гліцерин

- кілька крапель

вода дистильована

- 100 мл

Зважте на вагах основний фуксин, фенол. За допомогою циліндру виміряйте етанол та дистильовану воду.

Фуксин з кристалами фенолу і гліцерином розітріть у ступці до однорідної маси, потроху додайте спирт, весь час перемішуючи. Долийте дистильовану воду. Розчин витримують протягом 48 годин. при кімнатній температурі. Профільтруйте через паперовий фільтр. Зберігають при кімнатній температурі протягом декількох місяців. Застосовують для фарбування спор і кислотостійких бактерій за методом Ціля-Нільсена.

завдання

вказівки до виконання

3. Приготуйте розчин фуксину
Пфейффера.

Візьміть:

фуксину Ціля

- 1 мл

води дистильованої

- 9 мл

Застосовується для простого і складних (за Грамом) методів забарвлення.

4. Приготуйте насичений розчин метиленового синього.

Візьміть:

метиленової синьки

- 10 г

етанолу

- 100 мл

5. Приготуйте лужну метиленову синьку за Лєффлєром.

Для приготування лужної метиленової синьки використовують насичений розчин.

Для цього беруть:

спиртового розчину метиленової синьки

- 30 мл

гідрооксиду натрію або калію

- 1 мл

дистильованої води

- 100 мл

Застосовують для виявлення зерен волютину у коринебактерій і для простого методу фарбування.

6. Приготуйте водно-спиртовий розчин метиленової синьки.

Для приготування метиленової синьки використовують насичений розчин.

Візьміть:

спиртовий розчин метиленової синьки

- 10 мл

води дистильованої

- 100 мл

Розчин застосовують для простого методу забарвлення.

7. Приготуйте розчин кристалічного
генціанового фіолетового.

Для приготування розчину необхідні:

генціан фіолетовий

- 1 г

фенол кристалічний

- 2 г

етанол 96%

- 10 мл

вода дистильована

- 100 мл

Готують так як фуксин Ціля.

8. Приготуйте розчин Люголя.

Для приготування розчину необхідні:

йодид калію

- 2 г

йодид кристалічний

- 1 г

вода дистильована

- 300 мл

Йодид калію розчиняють у невеликій кількості води, потім добавляють кристалічний йод, після розчинення якого добавляють дистильовану воду до 300 мл.

Застосовують для забарвлення за методом Грама.

завдання

вказівки до виконання

9. Приготуйте папірці за Синьовим.

1. Приготуйте смужки фільтрувального паперу 1,5х2 см.

2. Приготуйте 1% спиртовий розчин генціанового фіолетового.

Візьміть:

кристалічного генціанового
фіолетового

- 1 г

етанолу

- 100 мл

3. У половинку чашки Петрі покладіть приготовлені смужки паперу і додайте приготовлений розчин барвника. Висушіть приготовлені папірці на повітрі або у термостаті.


^ Завдання №6. Згідно алгоритмів виконання практичних навичок проведіть необхідні розрахунки і приготуйте розчини барвників:

- 10 мл кристалічного генціанового фіолетового

- 10 мл метиленового синього

- 30 мл карболового фуксину Ціля

- 20 мл водного фуксину Пфейффера

- 10 мл лужного метиленового синього Лєффлєра

- папірці за Синьовим

- 300 мл розчину Люголя
Завдання №7. Проведіть дезінфекцію робочого місця, рук.
Завдання №8. Оформіть щоденник. Зробіть висновки.
Література:

Ситник І.О., Климнюк С.І., Творко М.С. «Мікробіологія, вірусологія, імунологія», стор. 26-31, 35-48.

В.А. Люта, О.В. Кононов «Практикум з мікробіології», стор. 20-23.



Додати документ в свій блог або на сайт

Схожі:

Бактеріологічний метод дослідження. Будова мікроскопа. Робота з імерсійною системою, виготовлення барвників. Мікроскопія готових препаратів iconВиготовлення препаратів з патологічного матеріалу. Виготовлення нативних...
Дисципліна: «Мікробіологія з основами імунології та технікою мікробіологічних досліджень»

Бактеріологічний метод дослідження. Будова мікроскопа. Робота з імерсійною системою, виготовлення барвників. Мікроскопія готових препаратів iconСкладні методи фарбування. Мікроскопія виготовлених препаратів
Дисципліна: «Мікробіологія з основами імунології та технікою мікробіологічних досліджень»

Бактеріологічний метод дослідження. Будова мікроскопа. Робота з імерсійною системою, виготовлення барвників. Мікроскопія готових препаратів icon1. Метод бокового (фокального) освітлення дозволяє обстежити
Метод дослідження в прохідному світлі використовують в основному для дослідження

Бактеріологічний метод дослідження. Будова мікроскопа. Робота з імерсійною системою, виготовлення барвників. Мікроскопія готових препаратів iconТехнологія одержання препаратів тетрацикліну
Тетрацикліни знайшли широке застосування як у медицині, так І у виробництві кормових препаратів. Серед них для сільського господарства...

Бактеріологічний метод дослідження. Будова мікроскопа. Робота з імерсійною системою, виготовлення барвників. Мікроскопія готових препаратів iconВиготовлення препаратів з культур мікроорганізмів І забарвлення їх простим способом
Дисципліна: «Мікробіологія з основами імунології та технікою мікробіологічних досліджень»

Бактеріологічний метод дослідження. Будова мікроскопа. Робота з імерсійною системою, виготовлення барвників. Мікроскопія готових препаратів iconСпецифіка об’єкта дослідження в гігієнічній науці І практиці, яким...
Розрізняють чотири основних специфічних для гігієни методи: епідеміологічний метод вивчення здоров’я населення; метод санітарного...

Бактеріологічний метод дослідження. Будова мікроскопа. Робота з імерсійною системою, виготовлення барвників. Мікроскопія готових препаратів iconВ кон’юнктиву, склеру, рогівку, передню камеру, райдужку І зіницю
Метод дослідження в прохідному світлі використовують в основному для дослідження

Бактеріологічний метод дослідження. Будова мікроскопа. Робота з імерсійною системою, виготовлення барвників. Мікроскопія готових препаратів iconВироби N1 І N2 виготовляються на фрезерних станках. Для їх виготовлення...
Для їх виготовлення є 100 кг металу. Витрата металу на виготовлення одного виробу N1 становить 2 кг, а на N2-4кг. Трудомісткість...

Бактеріологічний метод дослідження. Будова мікроскопа. Робота з імерсійною системою, виготовлення барвників. Мікроскопія готових препаратів iconФармакологія як наука та її місце серед медичних та фармацевтичних...
Розподіл лікарських препаратів в організмі. Метаболізм лікарських препаратів та шляхи виведення їх з організму

Бактеріологічний метод дослідження. Будова мікроскопа. Робота з імерсійною системою, виготовлення барвників. Мікроскопія готових препаратів iconМіста Вінниці
Підбір та аналіз матеріалів для виготовлення виробу. Розрахунок та виготовлення шаблонів

Додайте кнопку на своєму сайті:
Школьные материалы


База даних захищена авторським правом © 2013
звернутися до адміністрації
skaz.com.ua
Головна сторінка